Detección y Cuantificación de Mycobacterium tuberculosis con PCR digital en gotas de muestras extrapulmonares de pacientes con sospecha clínica de tuberculosis del Hospital Regional de Lambayeque 2020

Abstract

En los últimos años la detección del material genético de Mycobacteriumtuberculosis por PCR (reacción en cadena de la polimerasa) ha permitido tener una mejor alternativa para el diagnóstico por su alta sensibilidad y especificidad. La tuberculosis extrapulmonar, que es de interés en la presente investigación, representa entre un 10 y 20% de los casos confirmados de una región determinada. Este tipo de tuberculosis presenta baja carga bacteriana (paucibacilar), por lo que dificulta su diagnóstico. Las nuevas tecnologías como la PCR digital en gotas (ddPCR) es una alternativa para la detección y cuantificación de infecciones paucibacilares. Puesto que es menos susceptible a los inhibidores de la PCR convencional. El objetivo fue detectar y cuantificar M. tuberculosis en muestras extrapulmonares de pacientes con sospecha clínica de tuberculosis atendidos en el Hospital Regional Lambayeque durante el año 2020 - 2021. El estudio implicó analizar mediante la ddPCR, 50 muestras clínicas de diferente origen y con niveles bajos de ADN de M. tuberculosis. Anteriormente, se determinó la especificidad y sensibilidad de los cebadores en la ddPCR. Los resultados muestran que la ddPCR tiene un límite de detección de 0.8 copias/μL equivale a 3 genomas de la micobacteria. Se demostró que la ddPCR puede usarse para detectar niveles bajos de ADN de M. tuberculosis presente en pacientes de carga paucibacilar detectadas por la prueba de baciloscopia y tiene el potencial de usarse para diagnosticar y cuantificar de manera rápida todo tipo de muestras clínicas de tuberculosis extrapulmonar.