Detección y caracterización molecular del parásito Perkinsus sp., en el bivalvo Nodipecten subnodosus “Concha mano de león” (SOWERBY, 1835)

Abstract

El género Perkinsus, alberga a los principales patógenos de bivalvos (Organización Mundial de Sanidad Animal - OMSA,2019). El objetivo principal de esta investigación fue determinar la presencia/ausencia de Perkinsus spp en organismos silvestres de Nodipecten subnodosus extraídos en la región Tumbes, por lo que se analizaron muestras del recto/manto y branquias de cada organismo (100 individuos) de N. subnodosus (Mackin, 1951). A cada animal se le realizó cortes de 5mm2 , dos cortes en el recto/manto y dos en las branquias (muestra y contra muestra). Las muestras se procesaron utilizando el medio RFTM (diagnóstico microbiológico) y las contra muestras fueron conservadas a -20°C para el diagnóstico molecular. Los resultados obtenidos con el diagnóstico microbiológico, indicaban que el 20% de las muestras estaban presuntamente infectadas por Perkinsus spp. Para su confirmación las contra muestras de las presuntas muestras positivas, fueron analizadas mediante técnicas de diagnóstico molecular. El diagnóstico molecular constó de dos técnicas de extracciones de ADN, el método CTAB modificado y el Kit de extracción de ADN Power Soil. El ADN obtenido mediante CTAB modificado fue utilizado en una PCR dirigida al gen COI, donde todos los amplicones salieron positivos. Luego, con el ADN extraído de ambas técnicas se realizó una PCR y posteriormente una Nested PCR, amplificando solo los controles positivos, confirmando que los individuos de N. subnodosus analizados en esta investigación, estaban exentos de Perkinsus spp. Los controles positivos fueron caracterizados de una muestra positiva proveniente de Anadara tuberculosa “concha negra”, en un trabajo conjunto con Zavala M, en el 2020 que permitió conocer que P. chesapeaki y P. beihaiensis están presentes en la región Tumbes. Siendo esta la primera detección confirmada de Perkinsus sp. en el Perú (Zavala, 2020). La ausencia de Perkinsus spp en los individuos de N. subnodosus muestreados, podría deberse a una posible resistencia o refractabilidad de N. subnodosus frente a Perkinsus sp. lo que representaría una ventaja para el cultivo de esta especie. Esta tesis abre las puertas a nuevas investigaciones; como explorar los mecanismos de resistencia de N. subnodosus ante Perkinsus sp, nuevas técnicas de diagnóstico de Perkinsus sp, etc.